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DNA 사용않고 신형 유전자가위로 대두 유전자 교정

- 올레산 함량 높여... 다양한 식물 유전자 교정 가능성 제시 -

우리가 먹는 식용유지에는 다양한 종류가 있다. 그 중 올리브유를 최고로 친다. 산화가 어려운 올레산이 많이 함유되어 있기 때문이다. 올리브유에 포함되어 있는 주된 지방산인 올레산은 혈압 저하와 콜레스테롤 수치를 낮추는 기능이 있는 불포화지방산이다. 올레산 함량을 높인 콩기름이 나온다면 어떨까? 유전체 교정 연구단(김진수 단장) 식물 연구팀은 대두의 유전자를 교정하여 올레산 함량을 높였다. 더욱이 DNA를 사용하지 않아 기존의 GMO와는 차별된다.

연구팀은 신형 유전자가위 크리스퍼 Cpf1(CRISPR Cpf1)으로 대두와 야생담배 유전자 교정에 성공했다. 유전자가위1)는 특정 DNA 염기를 찾아가는 가이드인 크리스퍼RNA(crRNA)와 그곳을 자르는 절단효소로 구성된다. '크리스퍼 Cpf1 유전자가위(CRISPR Cpf1)2)'는 최근 널리 활용되고 있는 '크리스퍼 Cas9 유전자가위(CRISPR Cas9)'에서 사용되는 절단효소인 Cas9 대신 Cpf1 이라는 절단효소를 사용한다.

Cpf1은 구조적 차이로 인해 Cas9보다 결합하는 RNA 길이가 짧아 조작이 간편하다. 실험적으로 Cas9에 비해 정확도가 더 높다고 증명된 바 있어 3.5세대 유전자가위로 주목받고 있다. 2015년 학계에 보고된 이래 Cpf1 유전자가위는 DNA 형태로 인간배양세포와 동물세포에 적용되는 경우가 많았다. 하지만 식물세포에서는 DNA 형태로 유전자가위를 주입할 경우, Cpf1이 잘 작동하지 않아 새로운 방법을 찾고 있는 실정이었다.

이번 연구는 DNA 형태 대신 신형유전자 가위 Cpf1를 직접 식물세포에 주입함으로써 대두와 야생담배의 유전자 교정에 성공하였다. IBS 연구진은 지난 해 인간배양세포와 동물세포(생쥐)의 유전자 교정에 성공한 데 이어 식물세포에도 Cpf1을 crRNA와의 복합체 형태로 직접 주입하는 방식이 활용 가능함을 증명했다. 기존의 방식과는 달리 DNA를 매개로 사용하지 않기 때문에 외부 DNA 주입 가능성을 원천적으로 배제하므로 GMO와 차별된다.

연구진은 대두에서 분리한 원형질체에 Cpf1 유전자가위를 주입하여 불포화 지방산 합성에 중요한 유전자 FAD2를 교정했다. FAD2는 올레산(oleic acid)을 리놀레산(linoleic acid)으로 전환하는데, FAD2 유전자에 변화를 주면 올레산 수준이 증가한다. 또한 연구진은 FAD2가 아닌 비특이적 작용 위치에 대한 절단이 일어나지 않아 교정하고자 하는 염기에만 정확히 작동했다고 밝혔다.

또한 이번 연구에서는 흔히 먹는 작물인 대두뿐 아니라 야생담배에서도 Cpf1 유전자가위를 직접 주입해 유전자 교정이 가능하다는 사실을 확인했다. 연구진은 야생담배에서 AOC 유전자를 교정했다. AOC 유전자는 식물의 생장과 발달, 호르몬 합성에 주된 역할을 한다고 알려져 있다.

이로써 연구진은 Cpf1 유전자가위를 직접 주입하는 방식이 향후 다양한 식물 유전자 교정에 널리 활용될 수 있을 것으로 내다보고 있다. 우리나라에서 이 기술을 활용해 형질이 개선된 작물을 만들기 위해서는 유전자 교정 작물에 대한 사회적 논의도 함께 이루어질 필요가 있다.

이번 연구를 이끈 김진수 단장은 "유전물질(DNA)을 사용하지 않고 신형 유전자가위로 주요 작물인 대두의 유전자를 정확하게 교정할 수 있음을 밝혔다"고 이번 연구 성과의 의미를 강조했다. 본 연구결과는 생명과학 및 화학분야 국제 학술지인 '네이처 커뮤니케이션즈(Nature Communications, IF 11.329)' 온라인판에 2월 16일 게재됐다.


▲ [그림 1] DNA를 매개로 사용하지 않고, 신형 유전자가위 Cpf1를 직접 대두와 야생담배 세포에 주입

대외협력실 김소연

1) 유전자가위(Programmable nucleases): 특정 염기서열을 인지하여 해당 부위의 DNA를 절단하는 효소로서 인간 및 동식물 세포의 유전체 교정에 사용된다. 특정 유전자의 염기서열 DNA를 찾고 절단해 유전체 교정을 가능케 하는 징크핑거 뉴클레이즈(Zinc finger nuclease), 탈렌(TALEN; transcription activator-like effector nuclease), Cas9/Cpf1 크리스퍼(CRISPR) 유전자가위 등 3 종류가 개발되었다.

2) Cpf1 크리스퍼(CRISPR) 유전자가위: 생물의 면역체계에서 유래한 DNA 절단효소로서 Cpf1 단백질과 작은 크리스퍼RNA로 구성된다. 크리스퍼RNA가 상보적인 염기서열을 인식하여 Cpf1 단백질에 의해 DNA가 절단된다. RNA 유전자가위(RNA-guided endonuclease)라고도 불린다.

Center for Genome Engineering (유전체 교정 연구단)

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  • [뉴스1] DNA 사용 않고, 신형 유전자가위로 콩·야생담배 유전자 교정
  • [연합뉴스] '신형 크리스퍼 유전자가위'로 대두·담배 유전자 교정 성공
  • [대전일보] DNA 사용않고 신형 유전자가위로 대두 유전자 교정
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    최종수정일 2017-11-15 02:43